| 產(chǎn)品名稱 |
永生化人尿道成纖維細胞 |
| 商品貨號 |
MZ-0396 |
| 中文名稱 |
永生化人尿道成纖維細胞 |
| 組織來源 |
永生化人尿道成纖維細胞采用酶解法和基因轉(zhuǎn)染制備而來 |
| 特征特性 |
人尿道成纖維細胞是尿道壁結(jié)締組織中的主要細胞成分，屬于間充質(zhì)來源細胞，在尿道生理結(jié)構(gòu)維持、損傷修復(fù)及病理瘢痕形成中發(fā)揮核心作用。生理功能包括二個方面：1、結(jié)構(gòu)支撐作用，合成并維持尿道壁的細胞外基質(zhì)，為尿道提供機械強度和彈性，確保尿道形態(tài)穩(wěn)定；參與構(gòu)成尿道海綿體的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，支撐尿道上皮和平滑肌組織。2、調(diào)節(jié)與修復(fù)功能，分泌 FGF-7 等生長因子，促進尿道上皮細胞增殖和分化，維持尿道黏膜完整性；在尿道輕微損傷時，通過增殖和基質(zhì)重塑參與組織修復(fù)，維持尿道正常功能；與尿道平滑肌細胞、內(nèi)皮細胞相互作用，調(diào)節(jié)尿道收縮和舒張功能。 |
| 細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 培養(yǎng)條件 |
永生化人尿道成纖維細胞完全培養(yǎng)基 |
| 細胞凍存步驟 |
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。明舟生物按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 復(fù)蘇細胞步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
| 細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
